工程院食品安全院士團隊科研成果轉化平臺
當前位置:中国福彩网23选5 > 行業應用 > 食品及飲料行業

食品及飲料行業

综合版站中国福彩网: 嬰幼兒配方食品中克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗解決方案

中国福彩网23选5 www.mrepdj.com.cn

 我公司針對目前乳制品行業及質量監測單位檢驗阪崎腸桿菌的需求及情況,對阪崎腸桿菌檢驗相應的技術改進,使得阪崎腸桿菌檢出率較之前有很大的改進。擴充并完善了相關的微生物檢測試劑,使得技術操作人員能更準確、快捷的檢測出目標菌。

方案一:傳統微生物檢測法 

       依據GB 4789.40-2016食品衛生微生物學檢驗克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗,推出成套的阪崎腸桿菌檢驗解決方案,為生產企業及檢驗單位提供方便。 

 

 

第一法 克羅諾桿菌屬定性檢驗 操作步驟 

1.1 前增菌和增菌 取檢樣100 g(mL)加入已預熱至44 ℃裝有900 mL 緩沖蛋白胨水的錐形瓶中,用手緩緩地搖動至充分溶解,36 ℃±1 ℃培養18 h±2 h。移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯,44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2h。 

1.2 分離 1.2.1 輕輕混勻mLST-Vm 肉湯培養物,各取增菌培養物1 環,分別劃線接種于兩個阪崎腸桿菌顯色培養基平板,36 ℃±1 ℃培養24 h±2 h。 1.2.2 挑取至少5個可疑菌落,劃線接種于TSA 平板。25 ℃±1 ℃培養48 h±4 h。 

1.3 鑒定 自TSA 平板上直接挑取黃色可疑菌落,進行生化鑒定??寺夼蹈司艫鬧饕卣骷???裳≡襠ㄊ約梁謝蛉遠⑸鍔ㄏ低?。

 

克羅諾桿菌屬的主要生化特征 

生化試驗

特征

黃色素產生

+

氧化酶

-

L-賴氨酸脫羧酶

-

L-鳥氨酸脫羧酶

+

L-精氨酸雙水解酶

+

檸檬酸水解

+

發酵

D-山梨糖

-

L-鼠李糖

+

D-蔗糖

+

D-蜜二糖

+

苦杏仁甙

+

注:+99%陽性: -99%陰性;(+90%-99%陽性;(-

 

1.4 結果與報告 綜合菌落形態和生化特征,報告每100 g(mL)樣品中檢出或未檢出克羅諾桿菌屬。 

第二法 克羅諾桿菌屬的計數 操作步驟 

2.1 樣品的稀釋 2.1.1 固體和半固體樣品:無菌稱取樣品100 g、10 g、1 g 各三份,加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中,輕輕振搖使充分溶解,制成1:10 樣品勻液,置36 ℃±1 ℃培養18 h±2 h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯,44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2 h。 2.1.2 液體樣品:以無菌吸管分別取樣品100 mL、10 mL、1 mL 各三份,加入已預熱至44 ℃分別盛有900 mL、90 mL、9 mL BPW 中,輕輕振搖使充分混勻,制成1:10 樣品勻液,置36 ℃±1 ℃培養18h±2h。分別移取1 mL 轉種于10 mL mLST-Vm 肉湯,44 ℃±0.5 ℃培養24 h±2 h。 

2.2 分離、鑒定 同1.2,1.3。 

2.3 結果與報告 綜合菌落形態、生化特征,根據證實為克羅諾桿菌屬的陽性管數,查MPN 檢索表,報告每100 g(mL)樣品中克羅諾桿菌屬的MPN 值(見國標附錄B中表B.1)。 

 

實驗操作所用培養基及生化試劑

功能階段

實驗
序號

產品序號

產品名稱

規格

類別

前增菌

1

023130

緩沖蛋白胨水(BPW

250g

瓶(干粉)

CP0560A

緩沖蛋白胨水(BPW

9 ml×20

盒(管裝)

增菌

2

022212

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯基?。?span lang="EN-US" style="padding: 0px; margin: 0px;">MLST

250g

瓶(干粉)

SR0180

萬古霉素(改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯配套試劑)
每支添加于100 ml基礎培養基中

1 ml×10

盒(西林瓶)

CP0750

改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(MLST-Vm

10 ml×20

盒(管裝)

平板分離

3

CRM006

阪崎腸桿菌顯色培養基(DFI

1000 mL

瓶(干粉)

CRM006B

阪崎腸桿菌顯色培養基(DFI

90mm×20

盒(平板)

生化鑒定

4

024072

胰蛋白胨大豆瓊脂培養基(大豆消化酪素瓊脂培養基)TSA

250g

瓶(干粉)

024079

胰蛋白胨大豆瓊脂培養基(大豆消化酪素瓊脂培養基)TSA

90mm×20

盒(平板)

5

029170

氧化酶試紙

10/

6

075280

L-賴氨酸脫羧酶培養基

20

盒(西林瓶)

075290

氨基酸脫羧酶對照

20

盒(西林瓶)

7

075270

L-鳥氨酸脫羧酶培養基

20

盒(西林瓶)

8

075590

L-精氨酸雙水解酶培養基

20

盒(西林瓶)

075600

精氨酸雙水解酶對照

20

盒(西林瓶)

9

029110

無菌液體石蠟

10 mL×1

10

075090

D-山梨醇

20

盒(西林瓶)

11

075110

L-鼠李糖

20

盒(西林瓶)

12

075050

D-蔗糖

20

盒(西林瓶)

13

075560

D-蜜二糖

20

盒(西林瓶)

14

022120

西蒙氏檸檬酸鹽培養基

250 g

瓶(干粉)

15

071870

阪崎腸桿菌生化鑒定盒

11×10

盒(西林瓶)

 

 

不同培養基下菌種顯現出不同的菌落形態(菌株:阪崎腸桿菌 ATCC29544) 

                  培養基:TSA                                 培養基:阪崎腸桿菌顯色培養基DFI

 

 

方案二:恒溫熒光快速檢測法 

基于核酸水平的快速檢測技術目前日臻發展成熟,不少分子檢測技術已經寫入標準當中,比如PCR、LAMP技術;我司推出基于恒溫熒光檢測技術的微生物快速試劑盒,可用于食源性致病菌,包括阪崎腸桿菌。該試劑盒無需常規PCR中變性、退火、延伸等步驟不同溫度設計要求,只需提供一個適宜的恒定溫度即可。 因此,與常規PCR相比,恒溫熒光檢測技術更適合現場高通量快速檢測,具有簡單、快速、特異性強的特點。 

操作流程圖 

 

所需試劑、儀器及耗材列表

 

產品名稱

規格

備注

阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)

24test/

詳見“產品信息1

緩沖胨水增菌液BPW

250g/

 

移液槍、槍頭

1-10 μL、10-200 μL100-1000 μL各一把

槍頭推薦國產槍頭即可。

離心機

最大轉速不低于12,000 rpm,離心機轉子支持200 μL1.5 mL離心管離心。

詳見“產品信息2

恒溫金屬浴

——

詳見“產品信息3

 

產品信息1、阪崎腸桿菌核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)試劑盒組成 

 

LAMP檢測試劑盒

 

產品信息2、 

離心機

產品信息3、 

 

恒溫水浴鍋

中国福彩网23选5 | 產品中心 | 行業應用 | 客服中心 | 技術與培訓 | 關于環凱 | 新聞中心 | 加入環凱 中国福彩网23选5 |

客服電話:400-001-8883 技術服務電話:020-32078333 廣東環凱微生物科技有限公司 版權所有 粵ICP備10054586-4